蛋白印(yìn)跡(jì)儀就(jiù)是用(yòng)於免疫(yì)印(yìn)跡試(shì)驗的儀(yí)器(qì)。蛋(dàn)白質印(yìn)跡法(fǎ)（免疫(yì)印(yìn)跡試驗）即Western Blot。它是(shì)分(fēn)子生物(wù)學，生(shēng)物(wù)化(huà)學和免疫(yì)遺傳學中常用(yòng)的一(yī)種實驗方法(fǎ)。其(qí)基本原(yuán)理(lǐ)是(shì)通過特(tè)異(yì)性抗(kàng)體對(duì)凝膠(jiāo)電泳處(chǔ)理(lǐ)過的細胞或(huò)生(shēng)物組織(zhī)樣品進行著色。通(tōng)過分析著(zhuó)色(sè)的位置和著(zhuó)色深(shēn)度獲得(dé)特定(dìng)蛋白質(zhì)在所分(fēn)析的細(xì)胞(bāo)或組(zǔ)織中表達情況(kuàng)的(dí)信息。

 

使用全自(zì)動蛋白(bái)印跡(jì)儀的操作步驟(zhòu)如(rú)下(xià)：

1.準備樣品(pǐn)：將需要檢測的蛋(dàn)白(bái)樣品進(jìn)行電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)離(lí)，並將(jiāng)其轉(zhuǎn)移(yí)到聚(jù)丙烯(xī)酰(xiān)胺(àn)凝(níng)膠(jiāo)膜(mó)上(shàng)。

2.準備試(shì)劑(jì)：製備(bèi)蛋(dàn)白印跡(jì)檢測試劑盒，並按照說(shuō)明(míng)書(shū)添(tiān)加(jiā)相(xiāng)應(yīng)試(shì)劑(jì)。

3.貼(tiē)膜：將聚丙(bǐng)烯酰胺凝(níng)膠膜(mó)轉移到印跡(jì)膜上(shàng)，定(dìng)位(wèi)並貼(tiē)緊膜(mó)。

4.洗滌：將印(yìn)跡(jì)膜以及膜(mó)上的樣品(pǐn)進行洗滌處(chǔ)理，以去除潛(qián)在的(dí)非特(tè)異性結(jié)合。

5.初級抗(kàng)體結(jié)合(hé)：將準(zhǔn)備好的(dí)初(chū)級抗體(tǐ)添(tiān)加(jiā)到印(yìn)跡膜(mó)上(shàng)，進(jìn)行(háng)結(jié)合反應(yīng)。

6.次(cì)級(jí)抗(kàng)體結(jié)合：將(jiāng)準備(bèi)好(hǎo)的標記有酶(méi)的(dí)次級(jí)抗體(tǐ)添加到印跡膜(mó)上(shàng)，進(jìn)行結(jié)合反(fǎn)應。

7.顯色(sè)：將印跡(jì)膜與顯色(sè)劑反(fǎn)應(yīng)，產生特異(yì)性顏(yán)色。

8.停(tíng)止(zhǐ)反應(yīng)：將反應停止劑加入印跡(jì)膜(mó)上，停(tíng)止反(fǎn)應(yīng)。

9.圖像獲取(qǔ)：將(jiāng)印跡(jì)膜放置在全自(zì)動(dòng)蛋(dàn)白印跡(jì)儀中(zhōng)，啟(qǐ)動(dòng)設備進(jìn)行(háng)圖像獲(huò)取。

10.數據分析：對圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行(háng)分析(xī)，得出需(xū)要的數據(jù)結(jié)果